Plazmid DNA’nın Oral yol ile Aktarımında Bentonitin Koruyucu Etkisi

Gren Fluorescent Protein (GFP): Yeşil Florasan Proteini yaygın biçimde laboratuvar ortamında, beyin hücrelerinin gelişimi ya da kanser hücrelerinin yayılması gibi canlı hücre süreçlerinin izahı için kullanılmaktadır. İsveç Kraliyet Akademisi Biyokimyacılar, biyologlar, tıp alanında çalışan bilim adamları ve diğer araştırmacılar için yol gösterici bir kutup yıldızı olduğunu belirtmektedir. Günümüzde araştırmacılar, GFP’yi kullanarak, Alzheimer hastalığında sinir hücrelerini izleyebilmektedir.

Yapılan bir çalışmada, bentonit ve plazmid DNA Kompleksi kodlanarak gelişmiş yeşil florasan proteini (EGFP) oluşturulmuş, değişik ağırlık oranlarında hazırlandıktan sonra, ince bağırsak epitel hücreleri içine konmuştur. Hazırlanan değişik plasmid preperatları oral yol ile fareye verilmiştir. Plasmidler gerek saf plasmid gerekse EGFP halde fareye oral yol ile verildiğinde saptanamazken, ince bağırsağa aktarıldığı saptanmıştır. Bu bulgular neticesinde,

Bentonit Plasmid DNA’yı midedeki asidik ortamdan ve bağırsakta bulunan DNA ayrıştırıcı enzimlerden koruduğu ve başarılı bir şekilde ince bağırsağa aktardığı sonucuna varılmıştır.

Protective Effect Of Montmorillonite On Plasmid DNA İn Oral Gene Delivery Into Small Intestine
Kawase M, Hayashi Y, Kinoshita F, Yamato E, Miyazaki J, Yamakawa J, Ishida T, Tamura M, Yagi K.
Graduate School of Pharmaceutical Sciences, Osaka University, Suita, Japan.
PMID: 15577232 [PUBMED – indexed for MEDLINE]  Biol Pharm Bull. 2004 Dec;27(12):2049-51
Abstract: Montmorillonite, a bioinert clay mineral, was examined as a novel vector for an oral gene-delivery system. The complex of montmorillonite and plasmid DNA encoding the enhanced green fluorescent protein (EGFP) gene was prepared at various weight ratios, and then transfected into cultured intestinal epithelial cells (IEC-6) in vitro. The EGFP gene was clearly transcribed when the transfection was performed using the montmorillonite-plasmid complex at a weight ratio of 0.05:1. In contrast, no gene expression was detected by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) analysis when the transfection was performed with naked plasmid. Various plasmid preparations were given orally to mice, and the gene expression in the stomach and small intestine was examined by RT-PCR. Although no gene expression was detected in the mice receiving an oral administration of naked plasmid or polyethyleneimine-plasmid complex, the EGFP gene complexed with montmorillonite was expressed in the small intestine. These results indicate that montmorillonite protected the plasmid DNA from the acidic environment in the stomach and DNA-degrading enzymes in the intestine, and successfully delivered it into cells of the small intestine.